※?TSKgel SW型尺寸排阻色譜柱
一、SWXL 系列色譜柱初次使用注意事項(xiàng)
1. 流動(dòng)相現(xiàn)配現(xiàn)用，配好后使用0.45μm的水相濾膜過了后再超聲脫氣。
2. 樣品一定要完全溶解后，再使用0.45μm的針式濾頭過濾后再進(jìn)樣。
3. G2000SWXL/G3000SWXL/G4000SWXL 的耐受壓力是7.0MPa，所以要在儀器上設(shè)定限壓保護(hù)7.0MPa。
4. 初次拿到柱子后，參照柱盒中的Inspection data的方法評(píng)估柱效后再使用。
5. 柱子一定要常溫保存。不能放在冰箱冷藏。
6. 當(dāng)柱子峰形變寬了或者是壓力升高了，就需要清洗柱子了。
7. 對(duì)于使用尿素或者含SDS的流動(dòng)相的柱子，最好專柱專用，表面活性劑對(duì)柱床有不可逆的改性作用。
8. 最好使用保護(hù)柱，這樣可以有效延長分析柱的使用壽命。
二、色譜柱的清洗步驟
隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加，出現(xiàn)柱效下降無法達(dá)到分離要求，或伴有峰型拖尾、分叉等情況時(shí)，就需要清洗色譜柱。建議清洗過程中將色譜柱與檢測器斷開連接，防止流通池污染。
1.?反向連接色譜，并以最大流速的1/2運(yùn)行色譜柱 。
2.??使用5倍柱體積 (CV) 的pH3.0 0.5 mol/LNa2SO4水溶液沖洗色譜柱。
3.?使用5 CV Milli-Q或去離子水沖洗色譜柱。
4.?使用5 CV 20%乙腈清洗色譜柱。
5.?使用5 CV Milli-Q或去離子水沖洗色譜柱。
6.?再正向連接色譜柱，并以樣品分析時(shí)的流速使用至少10 CV的流動(dòng)相來平衡色譜柱。
★?請(qǐng)注意：應(yīng)逐漸提高流速，以免損壞色譜柱。
三、色譜柱的保存
? 短期保存（2-3天后還要使用）
在使用的流動(dòng)相條件下，擰好堵頭后，常溫保存。
? 長期保存（超過3天以上不用）
1.?用0.1 mol/L Na2SO4+0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液+0.05% NaN3保存（官方推薦）。
2.?如果不能使用NaN3，請(qǐng)用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相或水來保存色譜柱，建議頻繁用新配置的溶液替換色譜柱內(nèi)的溶劑。
3.?用0.1 mol/L Na2SO4+0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液+0.1% Proclin200保存。
4.??不要使用含有機(jī)溶劑的溶液保存色譜柱。
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※?TSKgel PW型尺寸排阻色譜柱
一、PWXL 系列色譜柱初次使用注意事項(xiàng)
1. 流動(dòng)相現(xiàn)配現(xiàn)用，配好后使用0.45μm的水相濾膜過了后再超聲脫氣。
2. 樣品一定要完全溶解后，再使用0.45μm的針式濾頭過濾后再進(jìn)樣。
3. G2500PWXL/G3000PWXL的耐受壓力是4.0MPa，G4000PWXL /G5000PWXL/G6000PWXL的耐受壓力是2.0MPa，所以要在儀器上設(shè)定限壓保護(hù)。
4. 初次拿到柱子后，參照柱盒中的Inspection data的方法評(píng)估柱效后再使用。
5. 柱子一定要常溫保存。不能放在冰箱冷藏。
6. 當(dāng)柱子峰形變寬了或者是壓力升高了，就需要清洗柱子了。
7. 對(duì)于使用尿素或者含SDS的流動(dòng)相的柱子，最好專柱專用，表面活性劑對(duì)柱床有不可逆的改性作用。
8. 最好使用保護(hù)柱，這樣可以有效延長分析柱的使用壽命。
二、色譜柱的清洗步驟
1、去除離子性雜質(zhì)：對(duì)于陽離子性吸附物質(zhì)，可以通過提高鹽濃度進(jìn)行過柱清洗。
2、去除疏水性雜質(zhì)：對(duì)于疏水性吸附物質(zhì)，可以通過提高有機(jī)溶劑的濃度進(jìn)行過柱清洗。
3、去除難溶性蛋白質(zhì)：使用含尿素的溶液清洗。
請(qǐng)根據(jù)樣品性質(zhì)，從方法1和2中選擇適當(dāng)?shù)那逑捶椒āＨ绻V柱性能仍不能恢復(fù)，可考慮采用方法3。但需注意尿素可能會(huì)殘留在色譜柱上。
★請(qǐng)注意：應(yīng)逐漸提高流速，以免損壞色譜柱。
三、色譜柱的保存
1、短期保存（2-3天后還要使用）
如果數(shù)天內(nèi)不會(huì)使用色譜柱，請(qǐng)從設(shè)備上取下色譜柱。如果溶劑中不含任何腐蝕性的離子，請(qǐng)使用保護(hù)塞封住色譜柱的末端。如果溶劑中含有腐蝕性離子，如鹵素，請(qǐng)?jiān)诒４嬷?，使用純水清洗色譜柱。
2、長期保存（超過3天以上不用）
如果長時(shí)間不使用色譜柱，請(qǐng)使用純水替換溶劑。然后請(qǐng)從設(shè)備上取下色譜柱，并使用保護(hù)塞封住色譜柱的末端。長期保存（例如，超過 3 個(gè)月）時(shí)，請(qǐng)使用含有 0.05 %疊氮化鈉的水溶液保存。
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※?TSKgel 蛋白分離用色譜柱
TSKgel親水性聚合物基質(zhì)的蛋白分離用色譜柱，包括SuperQ-5PW，?DEAE-5PW，SP-5PW，CM-5PW，DEAE-NPR，SP-NPR，BioAssist Q/S這幾個(gè)型號(hào)的離子交換色譜柱，還有疏水、親和等其他多種類型的柱子。
一、色譜柱的清洗
1.?先使用0.1～0.2 mol/L氫氧化鈉水溶液或20～40%的醋酸水溶液進(jìn)樣清洗?(100 μL，3～5針) 即可沖掉色譜柱上吸附的雜質(zhì)。
2.?使用20%~40%乙酸清洗水溶液進(jìn)樣清洗?(100 μL，3～5針) 即可沖掉色譜柱上吸附的雜質(zhì)。
如果采用該方法清洗后，色譜柱性能仍無法恢復(fù)，再考慮以下兩種方法。
3.?去除疏水性雜質(zhì)：在清洗液中添加10-20 %的甲醇、乙腈等有機(jī)溶劑后過柱清洗。
4.?去除難溶性蛋白：在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3 %的中性表面活性劑 (Triton、Tween等) 后過柱清洗。但需注意尿素及界面活性劑可能在柱中殘留。
二、色譜柱的保存
1.?請(qǐng)?jiān)谏V柱中注入保存溶液并擰緊保護(hù)塞后室溫保存，防止填料干燥。
2.?保存溶液：參考出廠檢測報(bào)告。
3.?色譜柱進(jìn)口或出口干燥、或者洗脫溶液的鹽析，會(huì)導(dǎo)致色譜柱堵塞。如果將色譜柱保存在 0℃以下，溶劑可能會(huì)凝固，導(dǎo)致色譜柱性能降低。
